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選擇biorad伯樂CFX Opus96實時熒光定量QPCR有哪些關(guān)鍵參數(shù)參考

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選擇伯樂(Bio-Rad)CFX Opus 96 實時熒光定量PCR儀時,需要重點關(guān)注以下關(guān)鍵參數(shù)和特性,以確保它能滿足您的實驗需求和預(yù)算??梢詫⑦@些參數(shù)分為三個核心維度:硬件性能、光學(xué)檢測系統(tǒng)、軟件與合規(guī)性。


一、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR儀硬件性能參數(shù)

1、樣品通量與模塊類型:

(1)96孔:標(biāo)準(zhǔn)配置,一次最多運行96個樣本(或更多,如果使用雙模塊版)。需確認(rèn)是標(biāo)準(zhǔn)96孔板還是低容板(如96-well twin.tec),后者可減少試劑消耗。

(2)模塊可更換性:CFX Opus 96的亮點之一是模塊可互換。您可以根據(jù)實驗需要,快速更換不同的模塊(例如,從標(biāo)準(zhǔn)96孔模塊換到384孔模塊)。這極大地擴(kuò)展了儀器的靈活性。因此,需要關(guān)注模塊的兼容性與價格。

2、溫控系統(tǒng):

(1)升降溫速率:通常 > 4-5°C/秒。更高的速率可以縮短循環(huán)時間,提高效率。

(2)溫度均一性:這是QPCR數(shù)據(jù)可靠性的關(guān)鍵。伯樂的帕爾貼溫控技術(shù)和的散熱設(shè)計(如右側(cè)散熱)保證了出色的孔間溫度均一性(通常宣稱在±0.1°C以內(nèi))。查看其溫度梯度功能的性能,可用于優(yōu)化退火溫度。

(3)熱蓋溫度:可調(diào)熱蓋(通??蛇_(dá)105-110°C),能有效防止頂部冷凝,尤其適用于低反應(yīng)體積。


二、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR儀

1、激發(fā)與檢測通道:

(1)通道數(shù)量:CFX Opus 96標(biāo)準(zhǔn)配置為4通道+1參比通道。這意味著單次運行最多可同時檢測4種不同的熒光染料(如FAM, HEX/VIC, ROX/Texas Red, Cy5)。

(2)光源:采用長壽命LED作為激發(fā)光源,取代了傳統(tǒng)的鹵鎢燈,更穩(wěn)定、壽命更長(宣稱>20,000小時)、無需預(yù)熱。

(3)檢測器:高靈敏度光電二極管。關(guān)注其靈敏度(可檢測低拷貝模板的能力)和動態(tài)范圍(通??煽缭?0個數(shù)量級)。

2、濾光片系統(tǒng):

(1)濾光片配置:檢查每個通道對應(yīng)的激發(fā)/發(fā)射濾光片波段,確保與您常用的熒光染料(如SYBR Green, TaqMan探針等)匹配。伯樂的儀器通常預(yù)設(shè)了優(yōu)化的濾光片組。

(2)多色檢測能力:對于多重qPCR,優(yōu)異的通道串?dāng)_控制和光譜校正功能至關(guān)重要。確保儀器軟件有強(qiáng)大的多組分校正功能。


三、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR儀軟件與合規(guī)性參數(shù)

1、操作軟件:

(1)CFX Maestro軟件:這是配套的核心軟件。評估其用戶界面是否直觀、實驗設(shè)置流程是否便捷(如創(chuàng)建板布局、定義探針/染料)、數(shù)據(jù)分析工具是否強(qiáng)大(如自動基線閾值設(shè)定、多種定量方法、熔解曲線分析、基因表達(dá)分析等)。

(2)云連接與遠(yuǎn)程監(jiān)控:CFX Opus系列支持云連接,可以通過手機(jī)或電腦遠(yuǎn)程監(jiān)控實驗進(jìn)度、接收完成通知,非常方便。

2、合規(guī)性與驗證:

(1)21 CFR Part 11合規(guī)性:如果您的實驗室需要滿足FDA的電子記錄和電子簽名法規(guī)(如在制藥、臨床診斷領(lǐng)域),務(wù)必確認(rèn)儀器和軟件提供相應(yīng)的合規(guī)性選件包。

(2)性能驗證工具:儀器是否提供或推薦配套的驗證試劑盒(如已知濃度梯度的DNA模板),用于定期驗證儀器的精度、準(zhǔn)確度和線性范圍。

(3)數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式:能否方便地導(dǎo)出為通用格式(如.csv, .xlsx),以便用其他軟件(如GraphPad Prism)進(jìn)行進(jìn)一步統(tǒng)計分析。


四、總結(jié)與選購建議

關(guān)鍵參數(shù)核查清單:

1、基礎(chǔ)需求:模塊類型(96孔/384孔?是否可換?)、4色檢測通道是否夠用?

2、性能核心:溫控均一性數(shù)據(jù)、光學(xué)系統(tǒng)靈敏度(尤其對弱表達(dá)基因)、多重檢測的串?dāng)_水平。

3、操作體驗:CFX Maestro軟件易用性、是否支持遠(yuǎn)程監(jiān)控。

4、長期合規(guī):是否需要21 CFR Part 11功能?售后驗證支持如何?

5、性價比:除了主機(jī)價格,還需考慮:可選模塊的價格、軟件升級費用、保修期限和服務(wù)合同。

TEL:18016231680

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